服务介绍
酵母双杂交用于鉴定与检测蛋白-蛋白互作,灵敏度高、适用性广。核蛋白酵母双杂交基于转录因子 GAL4 原理,可反映活细胞内蛋白互作的真实情况;膜蛋白酵母双杂交采用 split-ubiquitin 体系,将泛素分为 N 端与 C 端两部分,通过泛素特异性蛋白酶识别重建的完整泛素,实现膜蛋白互作筛选。
服务优势
- 一站式辅助检测方法,实验结论便捷可靠。
- 多年建库经验,4 套优化的 Total RNA 提取方案,有效保证 RNA 纯度与完整性。
- 无需依赖其他分子或细胞,直接检测蛋白-蛋白互作。
- 可同时筛选鉴定多个蛋白互作,实现高通量筛选分析。
- 多重筛选步骤(报告基因验证、酵母菌株双重筛选)降低非特异互作假阳性。
- 通过报告基因表达水平定量评估互作强度,进一步了解互作动力学与功能。
服务流程
酵母杂交文库构建流程:
-
1
接收订单与样品
-
2
Total RNA 提取与质量评估
-
3
mRNA 分离纯化
-
4
双链 cDNA 合成纯化
-
5
双链 cDNA 与载体融合
-
6
文库质量验证与交付
酵母双杂交筛选流程:
-
1
诱饵质粒构建与验证
-
2
诱饵自激活与毒性检测
-
3
诱饵与文库共转化酵母
-
4
阳性克隆挑选
-
5
质粒回收与测序
-
6
互作验证与结果交付
严格流程与各阶段质控确保蛋白互作鉴定准确可靠。